Javascript e koetsoe ho sebatli sa hau hajoale.Ha javascript e koetsoe, mesebetsi e meng ea sebaka sena sa marang-rang e ke ke ea sebetsa.
Javier Fidalgo, * Pierre-Antoine Deglesne, * Rodrigo Arroyo, * Lilian Sepúlveda, * Evgeniya Ranneva, Philippe Deprez Lefapha la Saense, Skin Tech Pharma Group, Castello D'Empúries, Catalonia, Spain * Bangoli bana ba na le lintlha tse ling mabapi le mosebetsi ona Equal semelo sa monehelo: Hyaluronic acid (HA) ke polysaccharide ea tlhaho e sebelisoang ho hlahisa li-dermal fillers molemong oa botle.Kaha e na le halofo ea matsatsi a 'maloa ka har'a lisele tsa motho, li-filler tsa dermal tse thehiloeng ho HA li fetoloa ka lik'hemik'hale ho lelefatsa bophelo ba tsona' meleng.Phetoho e tloaelehileng ka ho fetisisa ho li-fillers tsa HA-based tsa khoebo ke tšebeliso ea 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) e le motsoako oa ho tšela ho tšela liketane tsa HA.BDDE e setseng kapa e sa sebetseng e nkoa e se chefo ho
Ha e sebelisoa e le dermal filler, moeli o ka sehloohong oa HA ke phetoho ea eona e potlakileng ka har'a lisele ka lebaka la boteng ba lelapa le itseng la li-enzyme tse bitsoang hyaluronidases.Ho fihlela joale, liphetoho tse 'maloa tsa lik'hemik'hale mohahong oa HA li hlalositsoe ho eketsa halofo ea bophelo ba HA liseleng.3 Boholo ba liphetoho tsena li leka ho fokotsa phihlello ea hyaluronidase ho polysaccharide polymers ka liketane tsa HA tse hokahanyang.Ka hona, ka lebaka la ho thehoa ha marokho le maqhama a li-intermolecular covalent pakeng tsa mohaho oa HA le moemeli oa ho kopanya lifapano, HA hydrogel e amanang le sefapano e hlahisa lihlahisoa tse ngata tsa ho senya li-enzyme ho feta HA ea tlhaho.4-6
Ho fihlela joale, lik'hemik'hale tse kopanyang lik'hemik'hale tse sebelisetsoang ho hlahisa HA li kenyelletsa methacrylamide, 7 hydrazide, 8 carbodiimide, 9 divinyl sulfone, 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) Le poly(ethylene glycol) diglycidyl ether.10 ,11 BDDE hajoale ke eona e sebelisoang ka ho fetesisa ea ho kopanya.Leha mefuta ena ea li-hydrogel e netefalitsoe hore e bolokehile ka lilemo tse mashome, li-crosslinking agents tse sebelisoang ke li-reagents tse sebetsang tse ka bang cytotoxic mme, maemong a mang, mutagenic.12 Ka hona, litaba tsa bona tse setseng ka har'a hydrogel ea ho qetela e tlameha ho ba holimo.BDDE e nkoa e sireletsehile ha mahloriso a setseng a le ka tlase ho likarolo tsa 2 ka milione (ppm).4
Ho na le mekhoa e 'maloa ea ho bona hore na BDDE e na le masala a tlase, tekanyo ea ho hokahanya le boemo ba sebaka sa HA hydrogels, joalo ka chromatography ea khase, chromatography e sa kenyelletsoeng hammoho le mass spectrometry (MS), nuclear magnetic resonance (NMR) mekhoa ea ho metha fluorescence, le Sehlopha sa diode se kopantsoe le chromatography ea metsi e phahameng (HPLC).13-17 Phuputso ena e hlalosa ho fumanoa le ho khetholla ha sehlahisoa sa ho qetela se kopantsoeng le HA hydrogel se hlahisoang ke karabelo ea BDDE le HA tlas'a maemo a alkaline.HPLC le liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS analysis).Kaha chefo ea sehlahisoa sena sa BDDE ha se tsejoe, re khothaletsa hore palo ea eona e setseng e khethoe ka mokhoa o ts'oanang le mokhoa o atisang ho etsoa ho BDDE sehlahisoa sa ho qetela.
Letsoai la sodium le fumanoeng la HA (Shiseido Co., Ltd., Tokyo, Japane) le na le boima ba molek'hule ~ 1,368,000 Da (mokhoa oa Laurent) 18 le viscosity ea hare ea 2.20 m3 / kg.Bakeng sa karabelo ea crosslinking, BDDE (≥95%) e ile ea rekoa ho Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA).Phosphate e nang le letsoai le nang le pH 7.4 e rekiloe ho Sigma-Aldrich Company.Lisebelisoa tsohle, acetonitrile le metsi a sebelisitsoeng tlhahlobong ea LC-MS li rekiloe ho tsoa boleng ba kereiti ea HPLC.Asiti ea formic (98%) e rekoa joalo ka kereiti ea reagent.
Liteko tsohle li entsoe ho UPLC Acquity system (Metsi, Milford, MA, USA) mme e hokahane le API 3000 triple quadrupole mass spectrometer e nang le mohloli oa ionization oa electrospray (AB SCIEX, Framingham, MA, USA).
Ho qaptjoa ha li-HA hydrogel tse amanang le sefapano ho qalile ka ho eketsa 198 mg ea BDDE ho 10% (w / w) tharollo ea sodium hyaluronate (NaHA) ka pel'a 1% ea alkali (sodium hydroxide, NaOH).Motsoako oa ho qetela oa BDDE motsoakong oa karabelo e ne e le 9.9 mg/mL (0.049 mM).Ka mor'a moo, motsoako oa karabelo o ne o tsoakane ka ho feletseng 'me o kenngoa homogenized' me o lumelloa ho tsoela pele ka 45 ° C bakeng sa lihora tse 4.19 pH ea karabelo e bolokiloe ho ~ 12.
Ka mor'a moo, motsoako oa karabelo o ile oa hlatsuoa ka metsi, 'me ha ho qetela HA-BDDE hydrogel e ne e tlhotliloeng le ho hlapolloa ka PBS buffer ho finyella HA concentration ea 10 ho 25 mg / mL, le pH ea ho qetela ea 7.4.E le ho thibela likokoana-hloko tsa HA hydrogels tse hlahisitsoeng ka sefapano, li-hydrogel tsena kaofela li etsoa autoclaved (120 ° C metsotso e 20).Hydrogel e hloekisitsoeng ea BDDE-HA e bolokiloe ho 4 ° C ho fihlela tlhahlobo.
Ho hlahloba BDDE e teng sehlahisoa sa HA se kopantsoeng ka sefapano, sampuli ea 240 mg e ile ea lekanngoa 'me ea kenngoa ka har'a lesoba le bohareng (Microcon®; Merck Millipore, Billerica, MA, USA; volume 0.5 mL) le centrifuged ho 10,000 rpm mocheso oa kamore. Metsotso e 10.Kakaretso ea 20 µL ea metsi a hulang e ile ea bokelloa le ho hlahlojoa.
E le ho sekaseka maemo a BDDE (Sigma-Aldrich Co) tlas'a maemo a alkaline (1%, 0.1% le 0.01% NaOH), haeba maemo a latelang a finyelloa, sampole ea mokelikeli ke 1:10, 1:100, kapa ho fihlela ho 1:1,000,000 Haeba ho hlokahala, sebelisa metsi a deionized MilliQ bakeng sa tlhahlobo.
Bakeng sa lisebelisoa tsa ho qala tse sebelisitsoeng karabelong ea li-cross-linking (HA 2%, H2O, 1% NaOH, le 0.049 mM BDDE), 1 mL ea sampole ka 'ngoe e lokiselitsoeng ho tsoa lisebelisoa tsena e ile ea hlahlojoa ho sebelisoa maemo a tšoanang a tlhahlobo.
Ho fumana lintlha tse ikhethang tsa litlhoro tse hlahang 'mapeng oa ion, 10 µL ea 100 ppb BDDE tharollo e tloaelehileng (Sigma-Aldrich Co) e kentsoe sampoleng ea 20 µL.Tabeng ena, mahloriso a ho qetela a litekanyetso ho sampole ka 'ngoe ke 37 ppb.
Ntlha ea pele, lokisetsa tharollo ea BDDE ka motsoako oa 11,000 mg / L (11,000 ppm) ka ho hlapolla 10 μL ea BDDE e tloaelehileng (Sigma-Aldrich Co) ka 990 μL MilliQ metsi (tekanyo ea 1.1 g / mL).Sebelisa tharollo ena ho lokisa tharollo ea BDDE ea 110 µg/L (110 ppb) joalo ka mokhoa o tloaelehileng oa ho hlapolla.Ebe, sebelisa BDDE standard diluent (110 ppb) ho lokisa curve e tloaelehileng ka ho hlapolla motsoako oa mahareng makhetlo a 'maloa ho fihlela khatello e lakatsehang ea 75, 50, 25, 10, le 1 ppb.Joalo ka ha ho bonts'itsoe ho Setšoantšo sa 1, ho fumaneha hore BDDE curve e tloaelehileng ho tloha ho 1.1 ho ea ho 110 ppb e na le linearity e ntle (R2> 0.99).Mokokotlo o tloaelehileng o ile oa phetoa litekong tse 'nè tse ikemetseng.
Setšoantšo sa 1 BDDE sekhahla se tloaelehileng sa calibration se fumanoeng ke tlhahlobo ea LC-MS, eo ho eona ho bonoang kamano e ntle (R2> 0.99).
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, chromatography ea metsi le spectrometry ea boima.
E le ho khetholla le ho lekanya litekanyetso tsa BDDE tse teng ka har'a HA e kopantsoeng ka sefapano le litekanyetso tsa BDDE ka tharollo ea motheo, ho ile ha sebelisoa tlhahlobo ea LC-MS.
Karohano ea chromatographic e ile ea finyelloa ka LUNA 2.5 µm C18 (2) -HST (50 × 2.0 mm2; Phenomenex, Torrance, CA, USA) 'me e bolokiloe mocheso oa kamore (25 ° C) nakong ea tlhahlobo.Karolo ea selefouno e na le acetonitrile (solvent A) le metsi (solvent B) e nang le 0.1% formic acid.Mokhahlelo oa mobile o hlakisitsoe ke gradient elution.The gradiente ke ka tsela e latelang: 0 metsotso, 2% A;motsotso o le 1, 2% A;metsotso e 6, 98% A;metsotso e 7, 98% A;metsotso e 7.1, 2% A;Metsotso e 10 , 2% A. Nako ea ho sebetsa ke metsotso e 10 'me bophahamo ba ente ke 20 µL.Nako ea ho boloka BDDE e ka bang metsotso ea 3.48 (ho tloha ho 3.43 ho ea ho metsotso ea 4.14 ho latela liteko).Karolo ea selefouno e ile ea pompeloa ka tekanyo ea phallo ea 0.25 mL / min bakeng sa tlhahlobo ea LC-MS.
Bakeng sa tlhahlobo ea BDDE le quantification ka MS, tsamaiso ea UPLC (Metsi) e kopantsoe le API 3000 triple quadrupole mass spectrometer (AB SCIEX) e nang le mohloli oa ionization oa electrospray, 'me tlhahlobo e etsoa ka mokhoa o motle oa ion (ESI +).
Ho ea ka tlhahlobo ea ion fragment e entsoeng ka BDDE, sekhechana se nang le matla a phahameng ka ho fetisisa se ne se ikemiselitse ho ba sekhechana se lumellanang le 129.1 Da (Setšoantšo sa 6).Ka hona, ka mokhoa oa ho hlahloba li-ion-ion (MIM) bakeng sa quantification, phetoho ea boima (boima-ho-charge ratio [m / z]) ea BDDE ke 203.3 / 129.1 Da.E boetse e sebelisa mokhoa o felletseng oa scan (FS) le mokhoa oa ion ion scan (PIS) bakeng sa tlhahlobo ea LC-MS.
E le ho netefatsa ho khetheha ha mokhoa ona, sampuli e se nang letho (mohato oa pele oa selefouno) o ile oa hlahlojoa.Ha ho pontšo e ileng ea fumanoa ka sampuli e se nang letho ka phetoho e kholo ea 203.3 / 129.1 Da.Mabapi le ho pheta-pheta ha teko, liente tse tloaelehileng tsa 10 tsa 55 ppb (bohareng ba sekhahla sa calibration) li ile tsa hlahlojoa, e leng se ileng sa fella ka ho kheloha ha maemo a setseng (RSD) <5% (data e sa bontšoang).
Likahare tse setseng tsa BDDE li ile tsa lekanyetsoa ho li-hydrogel tse robeli tse fapaneng tsa BDDE tse amanang le sefapano, tse tsamaellanang le liteko tse 'ne tse ikemetseng.Joalokaha ho hlalositsoe karolong ea "Lisebelisoa le Mekhoa", palo e hlahlojoa ka karolelano ea boleng ba sekhahla sa ho khutlela morao sa BDDE dilution standard, e lumellanang le tlhōrō e ikhethang e fumanoeng phetohong ea boima ba BDDE ea 203.3 / 129.1 Da, e nang le ho boloka. nako ea metsotso e 3.43 ho isa ho 4.14 Ha e eme.Setšoantšo sa 2 se bontša mohlala oa chromatogram ea 10 ppb BDDE standard standard.Letlapa la 1 le akaretsa litaba tse setseng tsa BDDE tsa li-hydrogel tse robeli tse fapaneng.Mefuta ea boleng ke 1 ho isa ho 2.46 ppb.Ka hona, mahloriso a setseng a BDDE ka sampuli a amoheleha bakeng sa tšebeliso ea batho (<2 ppm).
Setšoantšo sa 2 Ion chromatogram ea 10 ppb BDDE reference standard (Sigma-Aldrich Co), MS (m / z) phetoho e fumanoang ke LC-MS tlhahlobo ea 203.30 / 129.10 Da (ka mokhoa o motle oa MRM).
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, ho hlahloba karabelo e ngata;MS, boima;m/z, tekanyo ea boima ho ea ho tefiso.
Tlhokomeliso: Mehlala 1-8 ke li-autoclaved BDDE cross-linked HA hydrogels.Palo e setseng ea BDDE ho hydrogel le tlhōrō ea nako ea ho boloka BDDE le tsona li tlalehoa.Qetellong, ho boetse ho tlalehoa ho ba teng ha litlhōrō tse ncha tse nang le linako tse fapaneng tsa ho boloka.
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;Ha, hyaluronic acid;MRM, ho hlahloba karabelo e ngata;tR, nako ea ho boloka;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;RRT, nako e lekanyelitsoeng ea ho boloka.
Ho makatsang ke hore tlhahlobo ea chromatogram ea LC-MS e bontšitse hore ho itšetlehile ka mefuta eohle ea li-autoclaved cross-linked HA hydrogel e hlahlobiloeng, ho bile le tlhōrō e eketsehileng ka nako e khutšoanyane ea ho boloka metsotso ea 2.73 ho ea ho 3.29.Mohlala, Setšoantšo sa 3 se bonts'a chromatogram ea ion ea sampole ea HA e amanang le sefapano, moo tlhōrō e eketsehileng e hlahang ka nako e fapaneng ea ho boloka hoo e ka bang metsotso ea 2.71.Nako e hlokometsoeng ea ho boloka nako (RRT) pakeng tsa tlhōrō e sa tsoa bonoa le tlhōrō e tsoang BDDE e fumanoe e le 0.79 (Letlapa la 1).Kaha rea tseba hore tlhōrō e sa tsoa hlokomeloa ha e bolokehe ka tlaase ho kholumo ea C18 e sebelisoang tlhahlobisong ea LC-MS, tlhōrō e ncha e ka lumellana le motsoako oa polar ho feta BDDE.
Setšoantšo sa 3 Ion chromatogram ea cross-linked HA hydrogel sampole e fumanoang ke LC-MS (MRM mass conversion 203.3 / 129.0 Da).
Likgutsufatso: HA, hyaluronic acid;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, ho hlahloba karabelo e ngata;RRT, nako e lekanyelitsoeng ea ho boloka;tR, nako ea ho boloka.
E le ho tlosa monyetla oa hore litlhōrō tse ncha tse hlokometsoeng e ka 'na ea e-ba litšila tse neng li le teng qalong ea lihlahisoa tse sebelisoang, lisebelisoa tsena tse tala li ile tsa boela tsa hlahlojoa ho sebelisoa mokhoa o tšoanang oa ho hlahloba LC-MS.Lisebelisoa tsa ho qala tse hlahlobiloeng li kenyelletsa metsi, 2% NaHA metsing, 1% NaOH metsing, le BDDE ka mokhoa o ts'oanang o sebelisoang karabelong ea sefapano.Ion chromatogram ea thepa e qalang e sebelisitsoeng ha ea ka ea bonts'a motsoako kapa tlhoro, 'me nako ea eona ea ho boloka e lumellana le tlhoro e ncha e bonoang.Taba ena e lahla maikutlo a hore ha se feela lisebelisoa tse qalang tse ka bang le metsoako kapa lintho tse ka sitisang mokhoa oa ho hlahloba, empa ha ho na pontšo ea hore ho ka khoneha ho silafala le lihlahisoa tse ling tsa laboratori.Litekanyetso tsa mahloriso tse fumanoeng kamora tlhahlobo ea LC-MS ea BDDE le litlhoro tse ncha li bonts'oa ho Lethathamo la 2 (lisampole 1-4) le ion chromatogram ho Setšoantšo sa 4.
Tlhokomeliso: Mehlala ea 1-4 e lumellana le lisebelisoa tse tala tse sebelisetsoang ho hlahisa li-autoclaved BDDE cross-linked HA hydrogels.Mehlala ena ha ea ka ea hlakisoa.
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;Ha, hyaluronic acid;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, tlhahlobo ea karabelo e mengata.
Setšoantšo sa 4 se lumellana le chromatogram ea LC-MS ea sampole ea thepa e tala e sebelisitsoeng karabelong ea ho hokahanya ha HA le BDDE.
Tlhokomeliso: Tsena tsohle li lekantsoe ka mokhoa o ts'oanang oa mahloriso le karo-karolelano e sebelisetsoang ho phethahatsa karabelo ea ho hokahanya.Linomoro tsa lisebelisoa tse tala tse hlahlobiloeng ke chromatogram li lumellana le: (1) metsi, (2) 2% HA aqueous solution, (3) 1% NaOH aqueous solution.Tlhahlobo ea LC-MS e etsoa bakeng sa phetoho ea boima ba 203.30 / 129.10 Da (ka mokhoa o motle oa MRM).
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;Ha, hyaluronic acid;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, tlhahlobo ea karabelo e mengata.
Maemo a entseng hore ho thehoe litlhōrō tse ncha li ile tsa ithutoa.E le ho ithuta hore na maemo a karabelo a sebelisetsoang ho hlahisa HA hydrogel e amanang le sefapano e ama joang ts'ebetso ea BDDE cross-linking agent, e lebisang ho thehoeng ha litlhōrō tse ncha (lihlahisoa tse ka khonehang), litekanyo tse fapaneng li ile tsa etsoa.Liqetong tsena, re ithutile le ho hlahloba crosslinker ea ho qetela ea BDDE, e ileng ea phekoloa ka mefuta e sa tšoaneng ea NaOH (0%, 1%, 0.1%, le 0.01%) ka mokhoa o nang le metsi, o lateloa ke kapa o se na autoclaving.Mokhoa oa baktheria oa ho etsisa maemo a tšoanang o tšoana le mokhoa o sebelisoang ho hlahisa HA hydrogel e amanang le sefapano.Joalokaha ho hlalositsoe karolong ea "Lisebelisoa le Mekhoa", phetoho e kholo ea sampuli e ile ea hlahlojoa ke LC-MS ho 203.30 / 129.10 Da.BDDE le mahloriso a tlhōrō e ncha e baloa, 'me liphetho li bontšoa ho Lethathamo la 3. Ha ho litlhōrō tse ncha tse ileng tsa fumanoa ka lisampole tse neng li se na autoclaved, ho sa tsotellehe boteng ba NaOH ka tharollo (samples 1-4, Letlapa. 3).Bakeng sa li-sampuli tsa autoclaved, litlhōrō tse ncha li fumanoa feela ka boteng ba NaOH ka tharollo, 'me ho thehoa ha tlhōrō ho bonahala ho itšetlehile ka mahloriso a NaOH ka tharollo (sampole 5-8, Letlapa la 3) (RRT = 0.79).Setšoantšo sa 5 se bontša mohlala oa chromatogram ea ion, e bontšang mehlala e 'meli ea autoclaved ho ba teng kapa ho se be teng ha NAOH.
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, tlhahlobo ea karabelo e mengata.
Tlhokomeliso: Chromatogram e ka holimo: Mohlala o ile oa phekoloa ka 0.1% ea metsi a metsi a NaOH le autoclaved (120 ° C metsotso e 20).Chromatogram e ka tlase: Mohlala ha oa ka oa phekoloa ka NaOH, empa o ile oa kenngoa tlas'a maemo a tšoanang.Phetoho ea boima ba 203.30 / 129.10 Da (ka mokhoa o motle oa MRM) o ile oa hlahlojoa ke LC-MS.
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, tlhahlobo ea karabelo e mengata.
Mehlala eohle ea autoclaved, e nang le NaOH kapa ntle le eona, mahloriso a BDDE a fokotsehile haholo (ho fihlela linakong tsa 16.6) (samples 5-8, Table 2).Ho fokotseha ha mahloriso a BDDE ho ka 'na ha e-ba teng ka lebaka la hore mocheso o phahameng, metsi a ka sebetsa e le motheo (nucleophile) ho bula lesale la epoxide la BDDE ho theha motsoako oa 1,2-diol.Boleng ba monoisotopic ba motsoako ona bo fapane le ba BDDE ka hona bo ke ke ba ameha.LC-MS e fumane phetoho e kholo ea 203.30 / 129.10 Da.
Qetellong, liteko tsena li bontša hore moloko oa litlhōrō tse ncha o itšetlehile ka boteng ba BDDE, NAOH, le mokhoa oa autoclaving, empa ha o amane le HA.
Tlhōrō e ncha e fumanoeng ka nako ea ho boloka hoo e ka bang metsotso ea 2.71 e ne e khetholloa ke LC-MS.Bakeng sa morero ona, BDDE (9.9 mg / mL) e ne e kenngoa ka 1% ea tharollo ea metsi a NaOH le autoclaved.Lethathamong la 4, litšobotsi tsa tlhōrō e ncha li bapisoa le tlhōrō e tsebahalang ea BDDE (nako ea ho boloka hoo e ka bang metsotso ea 3.47).Ho itšetlehile ka tlhahlobo ea ion ea ho arohana ha litlhōrō tse peli, ho ka fihleloa hore tlhōrō e nang le nako ea ho boloka metsotso ea 2.72 e bontša likaroloana tse tšoanang le tlhōrō ea BDDE, empa ka matla a fapaneng (Setšoantšo sa 6).Bakeng sa tlhōrō e lumellanang le nako ea ho boloka (PIS) ea metsotso ea 2.72, tlhōrō e matla haholoanyane e ile ea hlokomeloa ka mor'a ho arohana ka bongata ba 147 Da.Nakong ea mahloriso a BDDE (9.9 mg / mL) e sebelisitsoeng boikemisetsong bona, mekhoa e fapaneng ea ho monya (UV, λ = 200 nm) ka har'a mahlaseli a ultraviolet le eona e ile ea hlokomeloa ka mor'a ho arohana ha chromatographic (Setšoantšo sa 7).Tlhōrō e nang le nako ea ho boloka metsotso ea 2.71 e ntse e bonahala ho 200 nm, ha tlhōrō ea BDDE e ke ke ea hlokomeloa ka chromatogram tlas'a maemo a tšoanang.
Lethathamo la 4 Liphetho tsa sebopeho sa tlhoro e ncha ka nako ea ho boloka metsotso e ka bang 2.71 le tlhoro ea BDDE ka nako ea ho boloka metsotso ea 3.47.
Ela hloko: Ho fumana liphetho tsena, litlhahlobo tsa LC-MS le HPLC (MRM le PIS) li entsoe litlhorong tse peli.Bakeng sa tlhahlobo ea HPLC, ho sebelisoa tlhahlobo ea UV e nang le leqhubu la 200 nm.
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;HPLC, chromatography ea mokelikeli o phahameng oa ts'ebetso;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, ho hlahloba karabelo e ngata;m/z, tekanyo ea boima ho ea ho tefiso;PIS, sehlahisoa Ion scanning;leseli la ultraviolet, leseli la ultraviolet.
Tlhokomeliso: Likhechana tse ngata li fumanoa ka tlhahlobo ea LC-MS (PIS).Chromatogram e holimo: bongata ba likhechana tsa sampole tse tloaelehileng tsa BDDE.Chromatogram e tlase: Bophahamo ba bongata ba tlhoro e ncha bo fumanoe (RRT e amanang le tlhoro ea BDDE ke 0.79).BDDE e ile ea sebetsoa ka tharollo ea 1% ea NaOH 'me ea kenngoa ka ho toba.
Likgutsufatso: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, mokelikeli chromatography le boima spectrometry;MRM, ho hlahloba karabelo e ngata;PIS, sehlahisoa sa ion scan;RRT, nako e lekanyelitsoeng ea ho boloka.
Setšoantšo sa 7 Ion chromatogram ea 203.30 Da precursor ion, le (A) tlhōrō e ncha e nang le nako ea ho boloka metsotso ea 2.71 le (B) ho lemoha ha UV ea BDDE e tloaelehileng ea tlhōrō ka metsotso ea 3.46 ho 200 nm.
Har'a li-hydrogel tsohle tse amanang le sefapano tse hlahisitsoeng, ho ile ha hlokomeloa hore BDDE e setseng ka mor'a quantification ea LC-MS e ne e le <2 ppm, empa tlhōrō e ncha e sa tsejoeng e ile ea hlaha tlhahlobisong.Tlhōrō ena e ncha ha e lumellane le sehlahisoa se tloaelehileng sa BDDE.Sehlahisoa se tloaelehileng sa BDDE se boetse se entse tlhahlobo ea boleng bo tšoanang (MRM conversion 203.30 / 129.10 Da) ka mokhoa o motle oa MRM.Ka kakaretso, mekhoa e meng ea ho hlahloba e kang chromatography e sebelisoa e le liteko tsa moeli ho lemoha BDDE ho li-hydrogel, empa moeli o phahameng oa ho lemoha (LOD) o tlase hanyenyane ho feta 2 ppm.Ka lehlakoreng le leng, ho fihlela joale, NMR le MS li 'nile tsa sebelisoa ho khetholla tekanyo ea ho kopanya le / kapa ho fetoloa ha HA likarolong tsa tsoekere ea lihlahisoa tsa HA tse kopantsoeng.Sepheo sa mekhoa ena ha ho mohla e kileng ea e-ba ho lekanya ho fumanoa ha BDDE e setseng libakeng tse tlaase joalo ka ha re hlalosa sehloohong sena (LOD ea rona LC-MS mokhoa = 10 ppb).
Nako ea poso: Sep-01-2021